Преходният рецепторен потенциал на йоналния канал на меластатин 8 в макрофаги модулира

канал

  • Субекти
  • Обобщение
  • Въведение
  • Резултати
  • Функционално изразяване на TRPM8 в популации от макрофаги
  • TRPM8 модулира експресията на цитокини в макрофаги
  • TRPM8 модулира фагоцитната активност и подвижността на макрофагите
  • Роля на TRPM8 в макрофаги в контекста на възпалението
  • Дискусия
  • Методи
  • Допълнителна информация
  • PDF файлове
  • Допълващи се легенди за фигурата
  • Допълнителни фигури
  • Допълнителни методи

Субекти

  • Клетъчна смърт и имунен отговор
  • Колит
  • Моноцити и макрофаги
  • Преходни потенциални канали на рецептора

Обобщение

Въведение

По отношение на макрофагите вече е показано, че няколко TRP канала получават сигнали, важни за функцията на макрофагите. Например, макрофагите с дефицит на TRPC3 показват повишена апоптоза и променена ефероцитоза, 9 и повишено регулиране на TRPC6 се наблюдава в човешки алвеоларни макрофаги от пациенти с хронична обструктивна белодробна болест. 10 В миши перитонеални макрофаги (PM), TRPV2-медиирано свързване на частици и фагоцитоза са замесени в индуцираната от липополизахарид (LPS) продукция на цитокини, докато TRPV4 +/+ макрофагите възстановяват чувствителността на белите дробове към TRPV4 -/- към механични повреди, причинени от вентилатора. 11, 12

Тук демонстрираме, че активирането на конститутивно експресиран TRPM8 в миши макрофаги индуцира противовъзпалителен цитокинов профил и увеличава фагоцитозата, докато генетичното делеция или фармакологичното блокиране на TRPM8 предизвиква противоположни ефекти. В съответствие с тези констатации, ментоловите клизми са били защитни при мишки от див тип (WT) с експериментален колит, независимо от модулацията на освобождаването на невропептиди, докато мишките с дефицит на TRPM8 показват влошен колит. Мишките, възстановени с TRPM8-дефицитни макрофаги, постоянно показват повишена чувствителност към колит, демонстрирайки критична роля за конститутивната експресия на TRPM8 във вродения имунитет. Установено е, че провъзпалителните ефекти на макрофагите с дефицит на TRPM8 зависят от дисбаланса на фактора туморна некроза α (TNF) -α и производството на интерлевкин (IL) -10 in vitro и in vivo .

Резултати

Функционално изразяване на TRPM8 в популации от макрофаги

Изображение в пълен размер

  • Изтеглете слайд PowerPoint

TRPM8 модулира експресията на цитокини в макрофаги

TRPM8-медиирана модулация на експресията на цитокини в миши перитонеални макрофаги (PM). Освобождаване на TNF-α ( да се ) и IL-10 ( б ) от див тип (WT) и TRPM8-дефицитен (KO) PM след 8 h стимулация с LPS (100 ng ml -1) без или без ментол (100 μM). Активирането на TRPM8 инхибира TNF-α, но засилва освобождаването на IL-10 в WT, но не и PM с дефицит на TRPM8. Данните идват от три експеримента (средно и полу от четири мишки за генотип, анализирани в три екземпляра. * P

Ментоловите клизми предпазват мишки от див тип WT C57BL/6 от DSS колит (2%). ( да се ) Мишките, които са били лекувани с ментолови клизми два пъти дневно (100 µM), само са загубили малко тегло по време на DSS колит в сравнение с контролите на носителя. Данните са представителни за три експеримента, всяка група n = 6. * P 3,5 След това измерихме освобождаването на CGRP от дебелото черво, изолирано от здрави и колитични мишки (допълнителна фигура S5). TRPM8 агонистите ментол (100 µM) и ицилин (33 µM) инхибират механично индуцирано освобождаване на CGRP (90 mm Hg) в здравото дебело черво до приблизително същата степен, и двете, без да оказват присъщи ефекти върху освобождаването на CGRP. Интересното е, че освобождаването на CGRP от дебелото черво, предизвикано от разтягане на възпаленото дебело черво (2% DSS колит), е силно отслабено само по себе си, което предполага изчерпване/десенсибилизация на пептидергичните сензорни неврони. Нито един от TRPM8 агонистите не проявява ефект върху механично индуцирано освобождаване на CGRP при това условие.