Ефекти против затлъстяване на липазния инхибитор ct-ii, екстракт от ядлива билка, номаме
Обобщение
ЦЕЛ: Да се изследват инхибиторните ефекти на CT-II, екстракт от Nomame Herba, върху липазната активност in vitro и върху затлъстяването при плъхове, хранени с високомаслена диета in vivo .
ПРОЕКТИРАНЕ: Анализът за инхибиторния ефект на CT-II върху липазната активност се извършва чрез измерване на свободните мастни киселини, отделени след инкубация на средата с CT-II, свиня панкреатична липаза и триолеин (експеримент 1). В експерименти in vivo слаби или затлъстели плъхове (570–718 g) са хранени с високомаслена диета, съдържаща 60% мазнини със или без CT-II в продължение на 8 седмици (експеримент 2), в продължение на 14 дни (експеримент 3) или в продължение на 12 седмици (експеримент 4), съответно.
ИЗМЕРВАНЕ: времевият ход на телесното тегло, приемът на храна, телесното тегло (параметрични мазнини, черен дроб, сърце и бъбреци) и плазмените параметри (триглицериди, общ холестерол, глюкоза, AST, ALT и инсулин), общото количество на мазнините и общия холестерол измерена. Направени са и хистологични чернодробни изследвания.
Резултати: CT-II инхибира активността на свиня липаза по дозозависим начин in vitro (експеримент 1). Теглото на тялото и черния дроб бяха намалени и хистологичното изследване на черния дроб показа подобрение на мастния черен дроб при животни, лекувани с CT II (експеримент 2). CT-II значително инхибира наддаването на телесно тегло и повишаването на триглицеридите в плазмата по зависим от дозата начин, без да повлиява приема на храна при слаби плъхове, хранени с високомаслена диета. Повишените плазмени AST и ALT също намаляват (експеримент 3). Когато затлъстелите плъхове, хранени с диета с високо съдържание на мазнини, са били лекувани с CT-II за период до 6 месеца, първоначално е намалено телесното тегло и впоследствие наддаването на тегло е значително елиминирано. Общо телесните мазнини също бяха значително намалени и се наблюдава значително намаляване на AST и ALT в плазмата (експеримент 4).
ЗАКЛЮЧЕНИЯ: Тези резултати демонстрират, че инхибиторът на липазата CT-II е ефективен за предотвратяване и подобряване на затлъстяването, затлъстяването на черния дроб и хипертриглицеридемията при плъхове, хранени с диета с високо съдържание на мазнини.
Достъпът е предоставен от
Въведение
Панкреатичната липаза е най-важният ензим за храносмилането на триглицеридите в храната. 1 Приложението на липазен инхибитор беше обсъждано преди това като лечение за затлъстяване. Орлистат (Ro 18-0647), хидрогенирано производно на липстатин, получено от Streptomyces toxitricini, е мощен инхибитор на стомашната, панкреатичната и карбоксилестер 2 липаза и е доказано, че е ефективен за лечение на човешко затлъстяване. 3, 4, 5 Съществуването на липазни инхибитори е изследвано в различни хранителни продукти и се съобщава за наличието на тези инхибитори в зърнените култури, в пшеничните трици и пшеничните зародиши 6 и в соята 7, 8. Инхибиторите на липазата са търсени и в естествени продукти като китайски лекарства и различни билки. 9
Бобово растение, Cassia mimosoides L. var. номаме Макино (Nomame Herba), отглежда се в Япония и Китай и традиционно се консумира като чай в Япония. По време на избора на липазни инхибитори сред естествените продукти, екстрактът от Nomame Herba показа забележителен инхибиторен ефект върху липазата. В настоящото изследване се изследва инхибиторният ефект на този екстракт CT-II върху активността на липазата in vitro и ефектите на затлъстяването при плъхове, хранени с диета с високо съдържание на мазнини in vivo. .
Методи
Подготовка на CT-II
CT-II представлява фракция от водния етанолов екстракт от Nomame Herba, съдържащ предимно проантоцианидин (кондензиран танин). Приготвянето на фракцията беше както следва: 800 g от въздушната част на сухото растение бяха екстрахирани с 10 l 50% етанол (4 l, 3 l, 3 l, три екстракции). Екстрактът се подлага на Diaion HP 20 колона (Mitsubishi Chemical Corporation), промива се с 30% етанол и се елуира с 80% етанол. Елуираният разтвор се изпарява и лиофилизира до сухо, след което се получават 24 g CT-II прах. CT-II на прах се използва като смес с експериментална диета in vivo .
In vitro инхибиторен ефект на CT-II върху липазната активност
Анализът на липазната активност с използване на триглицериди като субстрат се извършва съгласно метода на Fukumoto et al. 10 В обобщение, инхибиторният ефект на (рН 7, 4) и 1 ml тетрахидрофуран (THF) 50% разтвор на CT-II се смесват в епруветка тип L (φ18 × 120 mm) и 1 ml от свинския разтвор. След това се добавя панкреатична липаза (Sigma тип II, 0.71 mg/ml като протеин в McIlvaine буфер) и се инкубира при 37 ° С в продължение на 15 минути с разклащане. Реакцията се спира чрез добавяне на етанол и освободените мастни киселини се титруват с 0,05 М NaOH. Празната проба се измерва, като се използва 50% THF без CT-II (експеримент 1).
In vivo ефекти на CT-II върху телесното тегло, телесните мазнини и метаболитите
Животни и диета.
В проучването са използвани женски плъхове Sprague-Dawley. Те бяха настанени в отделни клетки от неръждаема стомана при контролирана температура (24 ± 2 ° C) и на 12-часов цикъл светлина/тъмнина със свободен достъп до вода и диета с високо съдържание на мазнини на прах, съдържаща 60% мазнини, 7,5% въглехидрати, 24,5% протеин (6,7 kcal/g), както в предишното проучване. 11 Нормалната диета, съдържаща предимно обезмаслено соево брашно и рибно брашно, се нарича екструдирана диета (CE-2, Clea Japan Inc.).
Процедури.
CT-II първоначално показва липазна инхибиторна активност в проучването in vitro. Тъй като прекомерният прием на хранителни мазнини допринася за развитието на затлъстяване, превантивните ефекти на екстракта върху развитието на затлъстяване са изследвани при плъхове, хранени с диета с високо съдържание на мазнини. След адаптиране към диетата с високо съдържание на мазнини и лабораторните условия в продължение на 1 седмица, постните плъхове с тегло между 239 и 251 g бяха разделени на две групи. На контролната група беше дадена само диета с високо съдържание на мазнини; Другата група е получавала диета с високо съдържание на мазнини със смесен CT-II в концентрация от 2,5%. Теглото на тялото се измерва всяка седмица. След 8 седмици лечение с CT-II, животните бяха умъртвени, теглото на органите беше измерено и органите бяха изследвани хистологично (експеримент 2).