Редовни грижи и поддръжка на лаборатория Zebrafish (Danio rerio) Въведение протокол

Обобщение

Този протокол описва редовна поддръжка и грижи за поддържане на оптимални условия за отглеждане на зебра. Видеото показва протокола за поддръжка на системата, настаняване, хранене, размножаване и отглеждане на ларви на зебра.

Резюме

Протокол

1. Система за поддръжка

    Zebrafish се съхраняват в циркулационна система, която непрекъснато филтрира и проветрява водната система, за да поддържа качеството на водата, необходимо за здравословна водна среда. Циркулационната система също помага за филтриране на излишната храна и рибния тор. Системите Zebrafish се предлагат от различни компании, но ние използваме системи за водни местообитания, САЩ в нашата лаборатория. Температурата на околната среда или температурата на резервоара обикновено се поддържа между 26 и 28,5 ° C, а условията на осветление са 14:10 часа (светлина: тъмно). Система от водни местообитания на данио (напр. Система за маса) Разходи

110 mJ/cm 2 в началото на живота на лампата и скоростта на дозата намалява с течение на времето, което налага необходимостта от подмяна на балона, дори когато той изглежда все още функционира.

48 ч.
Забележка: Трябва да се отбележи, че необогатените саламурени скариди губят хранителна стойност на всеки час след излюпването. Следователно може да е подходящо или да се излюпи за 24 часа, или да се обогати повече от 48 часа, за да се получи максималната хранителна стойност от саламурените скариди.

  • Отпадъчните води от люпилната система се добавят към карантинните отпадъци, за да се дезинфекцират с белина и да се изхвърлят по-късно.
  • За да се съберат саламурените скариди, отстранете въздушната тръба и оставете културата да се утаи за 4-5 минути, но не повече от 10 минути. Излюпените саламурни скариди се събират на дъното на люпилото.
    1. Събирайте саламура от скариди, като използвате крана в долната част на инкубатора. Изхвърлете първоначалния поток, който се състои от неизлюпени саламурни яйца от скариди.
    2. След като изхвърлите неродените саламурни скариди, съберете излюпените саламурени скариди, които ще се използват като храна за рибата зебра.
    3. Отделете саламурените скариди от солената вода, като използвате мрежа за събиране на саламурени скариди (

      4. Отглеждане на ларви

        Оплодените яйца се държат в инкубатор (

      28,5 ° C) за 72 часа, докато ларвите се излюпят. Сега те са ларвите на хориона и свободното плуване е готово да се прехвърли в основен рибен резервоар. Ларвите трябва да се хранят 5 дни след оплождането (dpf) и се държат в средата на ембриони (състав, описан в част 3, 10) или водна система. Ларвите могат да се държат в кръгли чинии с

      50% или повече от водата в него се променя ежедневно. Смяната на водата трябва да включва отстраняване на мъртви или болни ларви и всякакви други отпадъци.

    4. Прехвърлете ларвите внимателно в резервоар, съдържащ преграда с малък размер (около 300-400 микрона). Мъртвите и болни ларви трябва да се отстраняват и да се добавят бавно всеки ден по няколко милилитра вода.
    5. След 14 дни резервоарите за ларви могат да бъдат подадени в системата и снабдени с малка струя циклична вода (1-2 капки в секунда). С нарастването на ларвите потокът от вода може да се увеличи. Могат да се използват различни размери на прегради в зависимост от размера на ларвите (напр. Размери на преградите 300-400, 500, 700-750 и 1000 микрона), а за възрастни риби трябва да се използва нормална пластмасова преграда.
    6. Обикновено отнема 3 месеца, докато ембрионите се развият в полово зрели възрастни.

    Представителни резултати

    Няколко критични проблема, които могат да възникнат в лаборатория за риба данио, включват запушване на водоснабдяването на отделни/всички резервоари в системата на корпуса, лошо качество на водата и течове в тръбите или резервоарите на циркулационната система. Освен това проблемите при получаването на ембриони от пило могат да бъдат друга причина за безпокойство. Отстраняването на тези проблеми е обсъдено по-долу.