Оцеляване и заразност на метациклични форми на Trypanosoma cruzi в храната
Оцеляване и заразност от метациклични форми на Trypanosoma cruzi в експериментално замърсена храна
Нестор Аньес *, Гладис Кризанте и Максимилиано Ромеро
Паразитологични изследвания J. F. Torrealba, Департамент по биология, Факултет на науките, Университет де Лос Андес, Мерида, 5101, Венецуела. * Автор-кореспондент: [email protected]
Записва се времето за оцеляване на метациклични форми на Trypanosoma cruzi, получени от храносмилателния тракт на Rhodnius prolixus, върху експериментално замърсена храна. Наблюденията между 1h и 18h след замърсяване разкриха наличието на изобилие и активни метацикли в замърсената храна през първите 6 часа, намалявайки тяхната популация около десетия час. Активността на метацикличните форми не показва разлики в храните, замърсени в твърда или течна фаза. По същия начин се демонстрира високата инфекциозност на Т. cruzi метацикли, които оцеляват в заразена храна след поглъщане от гръбначен гостоприемник.
Ключови думи: Trypanosoma cruzi, метацикличен, замърсяване, храна, оцеляване, инфекциозност.
Оцеляване и заразност на метацикличните форми на Trypanosoma cruzi в експериментално замърсена храна
Отчетено е оцеляването на метацикличните форми на Trypanosoma cruzi в замърсена храна. Наблюденията, проведени 1-18 часа след замърсяване на храната с метацикли от заразения Rhodnius prolixus, разкриват изобилие и активни бичури през първите 6 часа след замърсяването. Същата активност се наблюдава и при метацикли, поддържани върху течни или твърди замърсени храни. В допълнение се демонстрира заразността на оцелелите метациклични форми на T. cruzi в заразена храна след поглъщане от гръбначен гостоприемник.
Ключови думи: Trypanosoma cruzi, метациклично, замърсяване, храна, оцеляване, заразност.
Получава 29.11.2008 г. Приет на 03/11/2009
В предишна публикация, публикувана наскоро в тази среда, Añez & Crisante (2008) записват оцеляването на култивираните форми на Trypanosoma cruzi в експериментално замърсена храна. В него авторите посочват, че в 73% от плодовите и зеленчукови проби, използвани в техните експерименти, паразитите са останали живи за периоди между 6 и 72 часа след замърсяването, като по този начин се изчислява и най-големият брой живи бичове между 6:00 и 18:00. Въпреки че тези открития се отнасят до неинфекциозни форми на паразита, използваният метод и получените интересни резултати предлагат експериментална възможност, която може да бъде оценена чрез използване на инфекциозни форми от триатомини, заразени с T. cruzi. Този подход би позволил да се разбере какво може да се случи в райони, където болестта на Шагас е ендемична, когато триатомините, заразени от T. cruzi, колонизиращи домове или ги нахлуват от джунглата или перидомицилиарната среда, замърсяват храната, която остава изложена със своите заразени изпражнения. в битовата сфера, вътре или извън къщата, които накрая се поглъщат по различно време от жителите на една и съща.
Това проучване изследва оцеляването на метациклични форми на T. cruzi, събрани от експериментално заразени проби Rhodnius prolixus, след замърсяване на проби от плодове, зеленчуци, сокове и течно мляко с фекален материал, получен от ректалната ампула. По същия начин се регистрира инфекциозността на метацикличните клетки на T. cruzi, събрани от една от замърсените храни, излагайки лактиращите мишки на перорално поглъщане.
МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ
Изолиран от T. cruzi
Всички експерименти бяха проведени с помощта на изолат MHOM/Ve/92/2-92 на T. cruzi, получен от тежък остър случай на болест на Chagas от град La Maporita, щат Barinas, Венецуела. Преди това се характеризира молекулярно като T. cruzi I (Añez et al., 2004). Този изолат се поддържа в нашата лаборатория посредством периодични пасажи от експериментално заразени триатомини и/или мишки.
За извършване на експериментите са използвани възрастни образци на R. prolixus от колонията на ентомологичната лаборатория ? Herman Lent ?, Катедра по биология, Факултет на науките, Университет де Лос Андес, Мерида, Венецуела. Насекомите бяха погълнати от мишки, заразени с T. cruzi, показващи високи паразитомии. Веднъж заразени, триатомините се държат в инкубатор при 25 ° C и 70% относителна влажност, като често се изследват чрез микроскопско наблюдение на проби от екскременти, получени от всяко насекомо, до откриването на метацикличните форми (фиг. 1А). След като инфекцията бъде потвърдена, насекомите се дисектират, като се получава съдържанието на ректалната ампула, за да се пристъпи към преброяване на паразитите микроскопски, за да се изчисли броят на метацикличните форми на обем (фиг. 1Б).
В експериментите са използвани плодове и зеленчуци, на парчета 3 cm x 3 cm или натрошени, за да се получат соковете им, както и кокосова вода и течно мляко, разпределени в ½ литрови контейнери. Плодовите проби включват банан, пъпеш и лечоза, в двете им презентации на парчета и в сокове, докато от зеленчуците само доматите бяха представени и в двете форми, тъй като картофите и морковите, и двата варени, бяха поставени на парчета с посочения размер. Пробата от моркови беше елиминирана поради високото си първоначално замърсяване. Пробите на парчета бяха поставени в пластмасови контейнери (TC-Plate 6 гнездо, стерилна ? клетъчна звезда) с диаметър 3,5 cm във всяка ямка, правилно разделени и покрити (Фиг. 2). Пробите от сок, кокосова вода и мляко се съхраняват в стерилни пластмасови флакони от 5 ml с капачка с винт.