Клетъчна терапия за сърдечна недостатъчност при двойна торакотомия на плъхове за миокарден инфаркт и
Обобщение
Имплантирането на биотрансплантат за лечение на инфаркт на миокарда, причинен от LAD, в модел на гризачи обикновено изисква две операции на открито сърце. С цел намаляване на смъртността и осигуряване на оптимални условия за фиксиране на твърди желатинови и свързани с клетки биоматрици, са разработени минимално инвазивни процедури.
Резюме
Въведение
Лигирането на коронарната предна низходяща артерия (LAD) е златен стандарт за ИМ в модел на малко животно, което води до трансмурален инфаркт и зрял белег. Клетъчната терапия, прилагана в хроничната фаза на ИМ, изисква втора хирургическа интервенция. Обикновено се извършва средна стернотомия, за да се позволи интрамиокардно инжектиране на клетки или епикардно имплантиране на биографти. Такива инвазивни хирургични процедури увеличават смъртността, времето за възстановяване след операцията, болката и риска от инфекция. Представеният тук минимално инвазивен подход не само избягва това пристрастие, но също така осигурява оптимална достъпност на сърцето за провеждане на лечение. ИМ и епикардиална имплантация на клетки, свързани с тип биоматричен гел, се извършват в биещо сърце чрез лява интеркостална торакотомия.
Необходим е абонамент. Моля, препоръчайте JoVE на вашия библиотекар.
Протокол
ЗАБЕЛЕЖКА: Мъжки и женски плъхове Lewis, 200-220 g, бяха настанени при стандартни лабораторни условия (12-часов цикъл на светлина и тъмнина, вода ad libitum и храна, IVC клетка). Всички животни бяха третирани в съответствие с препоръките на швейцарския закон FELASA и относно защитата на животните.
1. Подготовка на клетки: Изолиране на мезенхимни стволови клетки от костен мозък
2. Първа торакотомия и LAD лигиране
3. Епикардно приложение на втория път за лечение на торакотомия
Необходим е абонамент. Моля, препоръчайте JoVE на вашия библиотекар.
Представителни резултати
Всички животни са се възстановили в рамките на 1 час след торакотомия. Заздравяването на раната беше бързо. Не се наблюдава инфекция или оток.
Двойната двойна торакотомия позволява оптимален достъп до сърцето (Фигура 1). Болката и смъртността след операцията бяха ниски. Животното бързо се възстанови от операцията и напълня (Фигура 2). Процентът на оцеляване на Kaplan Meir е бил 96% за първата торакотомия. Още четири плъха от 104 умират в следващото 24-часово приложение на лечение чрез втора торакотомия. Процентът на преживяемост на Kaplan-Meir варира от 100%, когато животното е получило втора торакотомия, но няма лечение (фалшиво лечение), 96% за групата MSC и фибринов уплътнител или 86%, когато животното получи MSC, инжектирано директно в миокарда (Фигура 3).
Ехокардиографската оценка в М-режим, извършена 2 седмици след LAD лигиране, показва намаляване на съкращаващата фракция (FS) от 44 ± 3% на 22 ± 4%. Представянето на честотата на FS, регистрирано при 104 животни LAD съобщение за лигиране на съобщения, дава доказателства за повторяемостта на метода. (Фигура 4). Коефициентът на вариация (CV) е 17%. В допълнение, ехокардиографията, проведена на 2 и 6 седмици след LAD лигиране, показва прогресия към сърдечна недостатъчност, предполагана от намаляване на фракцията на изтласкване (EF) и увеличаване на обемите на LV в диастола и систола. (Фигури 4 Y. 5). Развитието на трансмурален инфаркт в фалшиво оперираната група е потвърдено чрез оцветяване на Голднер в напречни сечения на сърцето (Фигура 6).
