Имунохистохимичният профил на Spitz nevi и конвенционални (не-spitzoid) меланоми
Субекти
Обобщение
Главен
Spitz nevus е придобита меланоцитна лезия, която обикновено се развива при деца и юноши, въпреки че не е необичайна при възрастни. Класически се смята, че е доброкачествен и се управлява консервативно. Обаче от описанието му през 1948 г. от Софи Шпиц, 1 неговата диагноза предизвиква безпокойство, тъй като не винаги е възможно да се направи недвусмислена диагноза Spitz nevus срещу меланом.
Въпреки че някои характеристики сега се оценяват систематично, за да се прави разлика между невусите на Spitz и меланомите, различните експерти могат да се различават при определянето на относителната важност на всеки от следните критерии: размер, форма, ограничение на кръстосаните гнезда, разпространение нагоре в епидермиса, разширение към подкожната, еозинофилни глобули, митотични фигури и тяхното повърхностно или дълбоко разположение в тумора, гигантски клетки, наличие на улцерация и промени в стромата. 2, 3, 4, 5 В допълнение, повечето лезии не показват много от конвенционалните критерии, които обикновено се използват за хистопатологичната диагноза на тумора, което подчертава липсата на обективни критерии за прогнозиране на биологичното поведение на тези лезии. 3, 6, 7 Класификацията на някои случаи като Spitz nevi 1 метастази илюстрира трудността при точното разграничаване на някои Spitz невуси от меланома въз основа единствено на хистологични критерии. Следователно, диагностичният термин „атипичен тумор на Spitz“ се използва за описване на лезии, които се отклоняват от типичния вид на Spitz nevi и имат несигурно биологично значение. 7
Тъй като диагностиката на подгрупа от лезии остава трудна, целта на това проучване беше да се оцени експресията на голям панел от маркери, използвайки рутинни имунохистохимични методи, за да се осигури универсално достъпен набор от протеини за разграничаване между Spitz невус и невус. Меланом. Сравнихме сигнатурите за експресия на протеини и в двете серии от типични шпицови невоми и меланоми с вертикална фаза на растеж в опит да установим мощен инструмент, който позволява да се предскаже биологичното поведение на меланоцитните лезии. Резултатите предоставят набор от девет диференциално експресирани маркера при Spitz nevomas спрямо меланоми, полезни при диференциалната диагноза на двете меланоцитни лезии.
материали и методи
Изграждане на тъканни проби и тъканни матрици
Бяха проучени общо 90 проби, включени в парафин и фиксирани с формалин от архивите на Отделението по патология, болница Universitario 12 de Octubre, Мадрид, събрани между 1995 и 2005 г. Двадесет и осем съответстваха на типичните Spitz невуси, в съответствие с характеристики на вретеното и/или епителиоидните гнезда на меланоцити, размер 3 и 62 не-шпицоидни меланоми във фаза на първичен вертикален растеж. Вертикалната фаза на растеж беше дефинирана съгласно предварително установени критерии: 8 всички гнезда на туморни клетки в епидермиса са по-малки от поне едно в дермата, наличието на гнезда на дермални туморни клетки с ширина 25 или повече клетки и митотична активност в интрадермалните неопластични клетки . Пациентите с меланом са лекувани по стандартни критерии: хирургична резекция с адекватни граници. При клинични показания са използвани адювантни интерферонови или химиотерапевтични терапии за метастатично заболяване.
Представителните оцветени с хематоксилин-еозин срези бяха оценени за хистологичните характеристики на авторите и бяха избрани блокове въз основа на адекватна тъкан (с дебелина най-малко 1 mm) 9 за изграждане на тъканните матрици.
Тъканен микрочип, съдържащ Spitz nevi и още два с VGP меланоми, бяха сглобени, както е описано по-горе, 9, включително поне две отливки с диаметър 1,5 mm на силно клетъчни области на първичните парафинови блокове. Освен това нормални тъкани (предимно реактивни лимфни възли, сливици и кожа) бяха поставени върху решетките като вътрешен контрол.
Имунохистохимична система и точкуване.
Имунохистохимично оцветяване се извършва върху 3 µm тъканни участъци от блоковете тъканни микрочипове, като се използват 22 различни първични антитела срещу биологично значими протеини (източник и концентрация, изброени в таблица 1). Имунодетекцията се извършва със системата за визуализация LSAB или Envision (и двете от Dakocytomation, Glostrup, Дания) като се използва диаминобензидин хромоген като субстрат. Всички секции бяха оцветени с противоток с хематоксилин (DAKO).
Таблица в пълен размер
Отрицателните контроли се получават чрез пропускане на първичното антитяло. Изборът на прагове и вътрешният контрол за антителата са установени преди това, за да се улесни възпроизводимостта на метода съгласно публикуваната литература 9 (вж. Таблица 1). Всички случаи са оценени независимо от двама патолози и са записани като положителни, като се вземе предвид експресията на протеина в неопластичните клетки и специфичната граница за всеки маркер. Всички несъответствия в процента на положителните клетки бяха разрешени чрез едновременна преоценка на секциите.
Статистически анализ
Точният тест на Fisher беше използван, за да се оцени дали специфична експресия на протеин е свързана с дадена лезия, било то Spitz невус или меланом. Статистическата значимост беше заключена за р 10 стойности, за да се избегне влиянието на множество тестове. Клиничните и хистопатологичните данни са съставени след извършване на всички статистически проучвания (Таблица 2).
Таблица в пълен размер
Резултати
Клинични и хистопатологични характеристики.
Серията включва 90 пациенти (52% жени и 48% мъже) на възраст от 3 до 91 години. Средната възраст на пациентите с Spitz nevi и меланом е съответно 21,6 и 62 години. Местоположението на лезиите е известно в 71 от 90 случая (79%), като най-често срещаните крайници за Spitz nevi (46%) и стволът на меланомите (31%). Всички пациенти с Spitz невуси са живи без метастази, докато 56% (35 от 62) от вертикално растящите меланоми са развили метастази и 34% (21 от 62) са починали.