Детоксикация на черния дроб и антиоксидантна защита чрез ксенобиотичен ефект_материал и методи

А. БИОЛОГИЧЕН МАТЕРИАЛ
Използвани са мъжки плъхове Sprague Dowley, разделени на 2 групи и по 4 подгрупи, със средно тегло на група от 194 до 202 g в началото на експеримента.

Б. ДИЕТИ
Подготвените диети бяха четири за всяка група (общо 8) и бяха наречени:

Група I: група, която е погълнала колбаса и е разделена на:
IDC: Контролна диета (10 mg Vit. E/K диета)
IDCE: Контролна диета с вит. E (257 mg вит. E/K диета)
ИД: Проблем с диетата (20% от хот-дога в диетата)
IDPE: Диетичен проблем с вит. E (257 mg вит. E/K диета)

Група II: групата, на която е прилаган нитрит (5 mg/d под формата на натриев нитрит), е разделена на:
IIDC: Контролна диета (10 mg Vit. E/K диета)
IIDCE: Контролна диета с вит. E (257 mg вит. E/K диета)
IIDP: Контролна диета с нитрит (5 mg нитрит/ден)
IIDPE: Контролна диета с vit.E и нитрит (5 mg нитрит/ден)

Те получавали храна и вода ad libitum. Конституцията на всяка от диетите е показана в таблицата за състава на диетите.

СЪСТАВ НА ДИЕТА***

*Обезмасленото мляко се използва вместо казеин.
**С изключение на витамин Е
***Диетите IDCE и IDPE също съдържат 257 mg витамин Е/К диета,
****Подгрупата IIDP консумира IDC диета плюс 5 mg натриев нитрит/ден (приблизително 11 mg/K/d)
Подгрупата IIPE консумира диетата IDCE плюс 5 mg натриев нитрит/ден (приблизително 11 mg/K/d)
Подгрупата IIDC консумира диетата IDC
Подгрупата IIDCE консумира диетата IDCE

В. РЕАКТИВИ:
Всички реактиви са с аналитично качество. Натриев карбонат, натриев бикарбонат, солна киселина, мононатриев фосфат, динатриев фосфат и водороден пероксид са закупени от E. Merck. Епинефрин, EDTA, BSA, bc. тиобарбитурат, CDBN и GSH са получени от Sigma Chemical Co. Витамин Е е дарен от Swiss Chemistry.

Плъховете бяха поставени индивидуално в метални клетки в лека и проветрива среда. Те получиха дванадесет часа светлина и дванадесет часа тъмнина и стайна температура 26 ± 1 градус С. Лечението беше 12 седмици (краткосрочно) [15].

След 12 седмици животните бяха умъртвени чрез обезглавяване и черният дроб незабавно беше отстранен, поставен в ледена баня и след това част от черния дроб беше почистена, претеглена и отделена (1,5 g) от по-големия лоб. Който беше измит с среда за хомогенизиране за отстраняване на кръвта (три пъти). 10% w/v хомогенат се приготвя в стъклен хомогенизатор от тип Potter-Elvehjem с тефлоново бутало. Средата за хомогенизиране съдържа 50 mmol/L натриев фосфатен буфер, рН 7,0.