Оплождане ин витро
Срокът инвитро Това е термин на латински, който означава в стъкло. Използва се, тъй като при първите биологични експерименти, при които се извършват тъканни култури извън живите организми, от които идват, те се извършват в стъклени съдове, като напр. епруветки, цилиндри или чашки на Петри.
В момента терминът инвитро Терминът "биологична процедура" се отнася до всяка биологична процедура, която се извършва извън организма, в която тя обикновено се провежда, за да се разграничи от експеримента in vivo където тъканта остава в живия организъм, в който обикновено се намира.
Разговорно се наричат бебета, заченати чрез IVF пиеш епруветка, отнасящи се до стъклени или пластмасови съдове, наречени епруветки, които често се използват в лаборатории по химия и биология.
Оплождане обаче инвитро изпълнява се в плоски чинии, наречени чаши на Петри; най-често използваните чаши на Петри са направени от пластмаса, но името на IVF все още е запазено.
Показания за ин витро оплождане
Първоначално IVF е разработена за преодоляване на ситуации на безплодие поради проблеми във фалопиевите тръби, но по-късно се забелязва, че техниката е била успешна и в други случаи на безплодие.
Въвеждането на интрацитоплазмена инжекция на сперматозоиди (ICSI) до голяма степен решава проблемите на мъжкото безплодие.
За да бъде IVF лечението успешно, е необходимо да имате здрави яйцеклетки, сперматозоиди, които могат да оплодят и матка, която може да поддържа бременност.
Въпреки че в някои страни лечението с ин витро оплождане се покрива от социални здравни услуги, тази техника обикновено се използва, когато други опции са неуспешни, тъй като ин витро оплождането носи големи разходи.
IVF може да се използва и при жени в менопауза, като се използват донорни ооцити. Това е също техника, която може да се има предвид при пациенти, които са претърпели пълна или частична загуба на плодовитост поради агресивно лечение срещу сериозна патология (като рак).
Методи за ин витро оплождане
Стимулация на яйчниците
Ин витро оплождането се започва на третия ден от менструацията и се състои от схема на прием на лекарства за стимулиране на развитието на множество фоликули в яйчниците.
При повечето пациенти се използват инжекции с гонадотропин (обикновено аналози на FSH), с чести контроли на нивата на естрадиол и фоликуларния растеж чрез гинекологичен ултразвук.
Обикновено отнема 10 дни инжекции. Спонтанната овулация по време на цикъла се предотвратява чрез използването на GnRH агонисти или GnRH антагонисти, които блокират естествената поява на лутеинизиращ хормон (LH).
Екстракция на яйцеклетки
Когато узряването на фоликулите се счита за адекватно, на пациента се прилага човешки хорионгонадотропин (? -HCG).
Тази молекула, която действа като аналог на лутеинизиращия хормон (LH), ще причини овулация около 36 часа след инжектирането, но процедурата за отстраняване се извършва точно преди това да се случи.
Екстракцията на яйцеклетките се извършва трансвагинално, с помощта на игла с ултразвуково управление, която пробива вагиналната стена, за да достигне до яйчниците.
Ооцитите се аспирират през иглата и фоликулярната течност се прехвърля в IVF лабораторията, за да се идентифицират яйцата. Това е напълно деликатен процес, екстракцията продължава около 20 минути и може да се извърши под обща или частична упойка.
Оплождане
Веднъж попаднали в лабораторията, извлечените ооцити се почистват, елиминирайки клетките, които ги заобикалят и ги подготвя за оплождане. В същото време спермата се подготвя за оплождане, като елиминира неактивните клетки и семенната течност.
Ако спермата идва от донор, тя вероятно ще е била приготвена преди да бъде замразена и поставена под карантина и когато се размрази, тя ще бъде готова за употреба.
Сперматозоидите и ооцитите се инкубират заедно (в съотношение приблизително 75 000: 1) в хранителната среда за около 18 часа.
Дотогава трябва да е настъпило оплождане и оплоденият ооцит трябва да покаже два пронуклеуса.
Когато броят на сперматозоидите е нисък, единична сперма се инжектира директно в ооцита, като се използва интрацитоплазмена инжекция на сперматозоиди (ICSI).
Оплодената яйцеклетка се прехвърля в специална хранителна среда и се съхранява около 48 часа, докато достигне 6-8 клетъчен стадий.
Ембриокултура
След като яйцеклетката е оплодена и е получена зигота, тя се култивира, за да насърчи нейното клетъчно делене и растеж, за да породи ембрион.
Тази култура трае между 2 и 5 дни и е много важно тя да се извършва в оптималните условия за ембриона, тъй като нейното качество и скоростта на имплантиране на същия ще зависят от нея, когато бъде прехвърлена в матката.
За да протече растежът на ембриона при възможно най-добрите условия, се използват различни видове хранителни среди:
Прости средства: прост състав и лесен за приготвяне. Те са оптимални за първоначалния растеж на ембриона (до 3 дни култура). Ембрионите обикновено се култивират в продължение на 3 дни преди имплантацията, след което те ще достигнат етап от 6-8 клетки.
Това позволява на ембриолога да наблюдава скоростта на клетъчното делене и генното активиране, за да гарантира, че ембрионът е жизнеспособен и че ще имплантира правилно.