Модел на мишка с протокол за частична обструкция на червата (преведен на испански)

Обобщение

Чревните запушвания са частично или пълно запушване на червата, което може да причини силна коремна болка, гадене, повръщане и предотвратяване преминаването на изпражненията. Тази процедура за създаване на частични чревни обструкции при мишки е надеждна при изучаване на механизмите на патологичния клетъчен растеж и смърт в червата.

Резюме

Въведение

Чревните запушвания са частично или пълно запушване в тънките или дебелите черва, което предотвратява движението на храносмилателната храна, течности и газове през червата1. Поради запушването, запушването предизвиква удебеляване на чревните стени, стесняване на лумена 2. Чревна непроходимост може да възникне в резултат на коремни или тазови операции, които причиняват образуване на тъкани от коремни сраствания или от стомашно-чревни разстройства като възпалителни заболявания на червата (болест на Crohn), дивертикулит, херния, вълна, стриктура, инвагинация, запек, фекална инфанкция, псевдо- обструкция, тумори и рак на 3, 4, 5. Чревните запушвания в тези случаи често водят до хипертрофия на tunica muscularis 6 .

PO на лумена предизвиква разтягане на червата и увеличава дебелината на гладкомускулния слой около запушването в отговор на необходимостта да се следва функционалната перисталтика 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13. Животински модели на чревни PO са разработени за изследване на хипертрофия на гладката мускулатура при мишки 7, плъхове 10, морски свинчета 11, кучета 12 и котки 13, които постоянно развиват подобна хипертрофия в чревните мускулни слоеве.

Тук предлагаме миши протокол за чревна PO хирургия, използваща силиконов пръстен. Мишките, получаващи PO хирургия, надеждно хипертрофират tunica muscularis на червата. В рамките на хипертрофичния мускул, SMC, ICC, PDGFRα + и невроналните клетки са драматично преработени.

Необходим е абонамент. Моля, препоръчайте JoVE на вашия библиотекар.

Протокол

Следният протокол е одобрен от Институционалния комитет за грижа и употреба на животните (IACUC) към Университета на Невада Рено (UNR) Ресурси и е в съответствие с цялата етика по отношение на използването на изследователски животни.

  1. Получават се зрели мишки C57BL/6 (на възраст 4-6 седмици) между 20-30 g. колония на лабораторни мишки в централизиран център за животни при ресурси на UNR.

2. операция за частична обструкция

Забележка: Операциите се извършват в стая, посветена на хирургични процедури. Всички хирургически инструменти са автоклавирани преди операцията. Стерилните хирургически рокли и ръкавици трябва да се носят от целия персонал в хирургичната зала по всяко време.

3.0 надлъжно със скалпел с 15 остриета, като се гарантира, че се врязва само кожата и се избягва порезът в мускулно-перитонеалния слой по това време. С помощта на форцепс и хирургически ножици внимателно отделете кожата от мускулно-перитонеалния слой, без да причинявате разрези на мускулно-перитонеалния слой. След като слоевете се отделят достатъчно (приблизително 1 cm x 4 cm), идентифицирайте linea alba в мускулно-перитонеалния слой и изрежете

2 cm по линията alba, за да се разкрие интраперитонеалната кухина с помощта на микро-форцепс и ножици.

  • Внимателно намерете и идентифицирайте слепеца. Бавно и внимателно отстранете цекума от интраперитонеалната кухина с микро-форцепс, извеждайки проксималното дебело черво и илеума с цекума навън върху стерилната завеса. Веднага навлажнете чревната тъкан със стерилна 0,9% напоена с физиологичен разтвор марля и поддържайте откритите тъкани навлажнени през цялото време, докато сте извън коремната кухина.
  • Намерете и идентифицирайте мезентериума между илеума и проксималното дебело черво. Направете разрез (

    3. наблюдение след операцията.

    1. След приключване на операцията преместете животните в инкубатор в стаята за възстановяване, където температурата и влажността се регулират. Наблюдавайте животните следоперативно на всеки 15 минути за първия час, след това на всеки 30 минути за втория час, докато животните са в инкубатора.
    2. Веднага след като предписаното наблюдение приключи, преместете животните в индивидуалната им клетка и ги наблюдавайте ежедневно за клинични индикации за болка 18 и за да се гарантира, че раната заздравява правилно, без да има признаци на усложнения (дехисценция).

    Необходим е абонамент. Моля, препоръчайте JoVE на вашия библиотекар.

    Представителни резултати

    мишка
    Фигура 1. Хирургично индуцирана частична чревна обструкция при миши модел. PO се индуцира чрез PO хирургия. Едномесечни мишки бяха обезболени, коремът им беше отворен чрез разрез, около илеума беше поставен силиконов пръстен и отворът беше затворен с шев. Мишките, претърпели операция, успяха да се възстановят за 8 или 13 дни. Съпоставените по възраст и пол мишки функционират по същия начин като PO мишките, освен че няма поставяне на пръстен. (ДА СЕ) Сурови изображения на стомашно-чревния тракт при мишки, претърпели PO или SO операция. Образни мишки на 8 и 13 дни след операцията (Б) Дисектираният GIT от мишки на А. тънките черва нагоре от пръстена беше разтегнат на 8 и 13 дни след PO операция и фекалните пелети в дебелото черво също бяха по-ниски при две 8 и 13 дни след PO операция в сравнение с 13-дневната след OS хирургични мишки за частично обструктивния силиконов пръстен. Скалите са 0,5 cm. кликнете тук, за да видите по-голяма версия на тази фигура.