Метод за култивиране на ларви на муха Lucilia sericata за терапия с ларви
Parasitol Latinoam 62: 79-82, 2007 FLAP
КОМУНИКАЦИИ
Метод за култивиране на мухи от ларви Lucilia sericata за терапия с ларви
МЕТОД НА КУЛТУРА ЗА Lucilia sericata ЛЕТЕТЕ ЛАРВИ ЗА ИЗПОЛЗВАНЕ В МАГОГОВА ТЕРАПИЯ
LUIS FIGUEROA *, JORDANA FLORES * и SANDRA RODRÍGUEZ *
* Институт по паразитология, Медицински факултет, Austral University of Chile. Кампус Isla Teja. Валдивия. Каре 567. Телефон: 63-221499. Факс: 63-214475.
Общите цели на изследването бяха: 1) Опишете цикъла на развитие на Lucilia sericata (Calliphoridae), в техните яйцеклетки, ларви, кукли и имаго и 2) Адаптиране на техника за дезинфекция на новите L. sericata и последващото получаване на стерилни ларви. Контролът на развитието се извършва чрез ежедневно определяне на различните му етапи. За техниката на дезинфекция яйцата бяха потопени последователно в разтвори на 0,5% натриев хипохлорит и 10% формалин и след това измити в 0,15 М NaCl. кръв и обикновен бульон.
Разработването на L. sericata в лабораторията той показа, че яйцеклетките и излюпването им в ларви са настъпили (средно ± стандартно отклонение) при 15 ± 3,5 часа, докато от ларви до какавиди 138 ± 17 часа и от какавиди при възрастни 126 ± 21 часа. Техниката на дезинфекция на яйцата на L. sericata показа 87% ефективност.
Общите цели на настоящото проучване бяха; 1) Опишете цикъла на развитие на Lucilia sericata (Calliphoridae) през етапите на яйцеклетката, ларвата, какавидата и имаго и 2) Разработване на метод за дезинфекция на яйцата на L. sericata. Процесът на развитие на тази муха се наблюдава ежедневно, определяйки времената, необходими за появата на всеки различен етап. Техниката на дезинфекция включва последователно третиране на яйцата в разтвори на 0,5% натриев хипохлорит и 10% формалин, след като яйцата са получени от експериментално кръстосване на мъжки и женски мухи в лабораторията. След това яйцата се изплакват в стерилни 0,15 MNaCl и пробите от яйца се разстилат върху соев агар от триптиказа, съдържащ 5% овча кръв, и също се инокулират в хранителен бульон. L. sericata се излюпва след 15 ± 3,5 часа, произвеждайки какавиди след 138 ± 17 часа, а възрастните се появяват след 126 ± 21 часа. Техниката на дезинфекция, използвана в настоящото проучване, е била 87% ефективна. Стигна се до заключението, че цялостното разработване, както и дезинфекцията на яйцата, може да се извърши успешно в лабораторията за производство на ларви, полезни при терапия с личинки.
Ключови думи: Lucilia sericata, терапия с личинки, муха, Чили.
ВЪВЕДЕНИЕ
Терапията с ларви премахва некротичната тъкан, насърчава растежа на тъканите и подобрява скоростта на зарастване. Мухите, които най-често се използват в терапията с ларви, са тези, принадлежащи към семейство Calliphoridae, които споделят няколко изгодни биологични свойства 1 .
От тази група видовете, с които работим, са Lucilia sericata гъли, които се хранят с навик, и един от преобладаващите видове в трупната фауна 1011. Те са космополитни и се срещат по-често през летните месеци 23 .
L. sericata Това е средно голяма муха, лесно разпознаваема по металния цвят на тялото си (зелен), особено по корема 4 .
Развъждането на тези духове е технически просто. За правилното му управление е необходимо да се знае еволюционният цикъл на вида, както и нуждите му от храна, температура и влажност 5 .
В нашата среда опитът с този тип лечение е почти непознат и много малко ценен поради предразсъдъчни културни проблеми, които ни карат да игнорираме положителните аспекти на този тип алтернативни терапии.
Целта на това проучване е да допринесе за познаването на терапията с ларви, както и за биологичния цикъл на L. sericata, и демонстрират, че е възможно да се възпроизведе този цикъл в лабораторията, за да се получат дезинфекцирани яйца.
МАТЕРИАЛ И МЕТОД
Ferreira 6 капана бяха използвани за събиране на мухите. Използван е буркан с диаметър 150 mm и височина 200 mm с черен цвят. В периферията на основата са направени 12 отвора с диаметър 13 мм, разположени в кръгове (през които са влизали мухите). В дъното на буркана беше поставен пластмасов съд за стръвта. На върха на тази тенджера имаше конус, който имаше основен диаметър 150 mm и горен отвор с диаметър 35 mm. Пластмасова торбичка (в която бяха заклещените мухи) беше поставена над горния отвор на буркана. (Фигура 1). Капаните бяха окачени на 1 метър от земята, в зони, изложени на слънце. Видовете и останките от риба са използвани като стръв. За класификацията бяха използвани вече установени таксономични ключове 7 .
Клетките са построени с телени кубчета с размери 500 х 500 х 500 мм, покрити с мрежа против комари. От едната страна е поставен лек втулен материал, достатъчно дълъг, за да работи вътре. В долната част на клетката има поднос с вода, за да се поддържа влажността и да се избегне излишъкът на алергенни материали, изпуснати в околната среда.
При храненето на мухите се използва гранулирана захар и сухо мляко (като източник на протеин), подредени в кладенци. Обърната чаша вода върху чаша на Петри с абсорбираща хартиена кърпа осигурява вода, без да бъде покрита от гъбички.
Парчета черен дроб, поставени на дъното на тъмни PVC тръби, осигуряват субстрат, в който мухите снасят яйцата си. По този начин беше предложена тъмна и защитена среда и лесна за работа за събирането му. Яйцата се събират всеки ден 8 .
Средно всяка от четирите клетки съдържа 500-1000 мухи. Мухите бяха добавяни в клетките всяка седмица, за да се заселят отново 8 .