Изследване на привличащата активност върху Ceratitis capitata (Wiedemann) от Ziziphus jujuba
Материали и методи
Растителен материал. Вземане на проби от плодовете на Zizyphus jujuba (Снимка 1) Той е направен директно от дърветата, разположени във Валенсия (Испания).
Тест за привличане. Тестовете за привличане се провеждат с мухи, отглеждани в насекоми. Използваните условия на околната среда са постоянни; фотопериодът е 16: 8 (светлина: тъмно), с 26 ± 1ºC температура и 60 ± 10% относителна влажност. Възрастните на C. capitata Те се хранят със смес от автолизат на дрожди (Sigma, Мадрид) и захароза в съотношение 1: 4 (w/w). Докато ларвите се хранят със смес от пшенични трици, бирена мая, захароза, нипагин, нипазол, вода и солна киселина (20: 5: 1: 0,5: 0,5: 10: 0,1) по тегло.
Колонията на C. capitata Съхранява се в 30 * 30 * 20 см метакрилатни клетки. (Снимка 2), където мухите остават по време на своята възрастна фаза. Женските снасят яйцата през мрежа, разположена от едната страна на клетката. Яйцата попадат в тава с вода, откъдето се събират с помощта на пипета
Пастьор и се засяват на изкуствена диета, където се излюпват и развиват. Когато развитието на ларвите е на път да свърши и линеите са завършени, таблата за хранене с ларви се поставя в тава с почва, за да могат ларвите да изскочат и да се погребят, за да образуват какавидата. Тези какавиди са тези, които се събират, за да бъдат поставени в нова клетка, където възрастните, които ще формират новото поколение, ще се появят отново.
Клетките са метални 30х30х30см (Снимка 2), с 1 мм странични стени от метална мрежа, метална основа и метакрилатен капак за улесняване на достъпа за почистване. От едната му страна има отвор с втулка от плат, която позволява управлението на мухите.
Тестовете се извършват с 2-дневни и 5-дневни мухи. За да се провери привличането при млади мухи (2-дневни мухи) и възрастни мухи (5-дневни мухи), храната се изважда от клетката съответно на 1 и 4 ден.
Извършват се 3 повторения на всеки тест и контрол с вода. За това във всяка клетка се въвеждат 30 мъжки и 30 женски; общо използваме 4 клетки всеки ден, че се провежда тест за привличане.
Мухите остават за 1 час в зоната за изпитване, за да се приспособят към новите условия на околната среда и да избегнат стреса, причинен от улавянето и прехвърлянето на насекомото в зоната за изпитване.
След това във всяка клетка се поставя чашка на Петри; В клетка 1 се поставя зъбен памук или памучен фитил, напоен с вода, който ще служи като контролна за тестовете, за да се сравни съществуващото привличане към плодовете и към атрактант без аромати, но влажен. Клетки 2, 3 и 4 съдържат по едно парче зрели плодове на всяка плоча.
След като мухите влязат в контакт с плодовете, ще им бъде позволено половин час да свикнат с летливите компоненти на плодовете и оттам нататък всички клетки ще бъдат преброени на всеки 10 минути, мъжете и жените се записват. се поставят върху плодовете, както и броят на умрелите мухи.
Тест за аерация за получаване
летлив
За да се получат летливите вещества от плодовете, плодовете се поставят в отворен стъклен цилиндър, свързан в единия край с генератор на нулев въздух, а в другия край е свързан с термодесорбционна тръба с дължина 8 cm x 0,6 cm. с 200 mg Tenax TA като абсорбент.
Преди аериране се подава проба "нулев въздух" през цилиндъра с поток от 1 L/min в продължение на 5 минути, за да се проветри цилиндърът и че той не съдържа останки от анализирани предишни проби; обемът ще бъде 5 L.
След като плодовете бъдат въведени в цилиндъра, текущият поток се поддържа на 1 L/min за 3 минути. След това времето пробната тръба се поставя в края на цилиндъра и дебитът се намалява до 0,1 L/min. Времето за вземане на проби се запазва за 30 минути.
Този процес се повтаря едновременно 4 пъти, четири с целия плод и още четири с натрошените плодове.
Анализ на летливи съединения
Съединенията, адсорбирани върху епруветките на Tenax, се анализират чрез термична десорбция, съчетана с газова хроматография и масспектрометрия (TD/GC/MS).
Термичната десорбция се извършва при следните условия:
- Първична десорбция на пробата: Пробата беше подложена на температура от 300 ° С в продължение на 10 минути, преминавайки през епруветката, през това време, поток от хелий от 100 mL/min. Разделението на входа беше 1,5 ml/min, опитвайки се да бъде възможно най-ниско
за да се избегне загуба на проба.
- Взетата проба от епруветката се провежда в a "студен капан" кварц, напълнен с Tenax TA ®, който остава по време на първична десорбция при температура от? 30ºC.