Ефекти от диета с високо съдържание на мазнини върху хранителните параметри и мастната тъкан
Ефекти от диета с високо съдържание на мазнини върху параметрите на хранене и висцералната бяла мастна тъкан на плъхове Sprague Dawley
Ефекти от диетата с високо съдържание на мазнини върху хранителните параметри и висцералната бяла мастна тъкан на плъховете Sprague Dawley
1 Кариера на храненето и диететиката, Факултет по здравни грижи, Университет Сан Себастиан, Консепсион, Чили.
2 Център за усъвършенствана микроскопия, CMA Bio-Bio, Факултет по биологични науки, Universidad de Concepción, Concepción, Чили.
3 Катедра по хранене и диететика, Фармацевтичен факултет, Университет на Консепсион, Консепсион, Чили.
4 Катедра за предклинични науки, Медицински факултет, Университет де Ла Фронтера, Темуко, Чили.
5 Докторска програма по медицински науки, Universidad de La Frontera, Temuco, Чили.
МАТЕРИАЛ И МЕТОД
Животни: Използвани са 10 мъжки плъха Sprague Dawley на възраст 6-7 седмици, получени в Регионалния център за напреднали изследвания за живота, разположен в Университета в Консепсион. Те бяха настанени в метални клетки с обогатена среда, при контролирани условия на температура 25 + 1ºC и влажност 60%, с 12-часов цикъл светлина/тъмнина. Изследването е проведено съгласно насоките на Ръководството за грижа и използване на лабораторни животни (Национален изследователски съвет, 2011 г.) и е одобрено от Научната комисия по етика на Университета в Ла Фронтера (Фолио № 113_17).
Диети: След седмица на аклиматизация с достъп до конвенционална диета и вода ad libitum, животните бяха разделени на случаен принцип в 2 групи. Във всяка експериментална група беше използвано n = 5, като се вземат предвид биоетичните принципи на Ръсел и Бърч: заместване, редукция и усъвършенстване (Tannenbaum & Bennett, 2015). Контролната група получи конвенционална диета с енергийна плътност 3 kcal/g, приготвена от Labdiet (САЩ). Експерименталната група получи диета с високо съдържание на мазнини с енергийна плътност 5 kcal/g, приготвена от PragSolutions Serviços e Com. Ltda. Пелети (Сао Пауло, Бразилия), които се съхраняват при -20 ° C за запазването му през цялото проучване. Описаният протокол се провежда в продължение на 10 седмици (Gregorio et al. 2013; Fernandes-Lima et al., 2016). Разпределението на макронутриентите и на двете диети е описано в Таблица I.
Таблица I Разпределение на макроелементите от използваните диети.
DC: конвенционална диета; HFD: Диета с високо съдържание на мазнини.
Биометрия и хранителни променливи: Телесното тегло (g) на всяко животно се определя веднъж седмично по време на експерименталния протокол, докато приемането на твърда (g) и течна (ml) храна се записва ежедневно, представлявайки средната стойност на клетка, претеглена с броя на животните. Енергийният прием се определя количествено от твърдия прием на всяко животно, натрупаната печалба чрез добавяне на нарастването на телесното тегло всяка седмица и преобразуването на фуража се изразява като получената връзка между количеството консумирана храна и дневното наддаване на тегло на животно (Olguin и др., 2015).
Евтаназия: В края на интервенцията и след 8-часов пост евтаназията е извършена чрез газово насищане с качулка Isoflurane, визуално потвърждавайки състоянието на безсъзнание. Животното е поставено в гръбната кост за обезкървяване чрез сърдечна пункция. Кръвта, поставена в епруветки с литиев хепарин, беше центрофугирана (3000 rpm в продължение на 15 минути) при 4 ° C, съхраняваща плазмата при -80 ° C за последващ анализ.
Морфологично проучване: Веднага след евтаназия се екстрахира висцералната бяла мастна тъкан, като се вземат 3 участъка от 3-4 mm2 на животно, които се фиксират чрез потапяне в разтвор на Bouin (пикринова киселина, формалин и оцетна киселина), включително в парафин, монтиран върху стъклени стъкла с покритие от поли-L-лизин и обработени за получаване на серийни сечения от 7 mm върху микротом 98.
DC: конвенционална диета; HFD: Диета с високо съдържание на мазнини. * Различно от DC групата (p Фиг. 1 Еволюция на телесното тегло. DC: Конвенционална диета; HFD: Диета с високо съдържание на мазнини. * Различна от DC групата в 3 пъти (p
Диетичният прием и в двете групи е средно 27,66 ± 0,3 g и 19,73 ± 0,8 g при тези, хранени съответно DC и HFD, със значителна разлика след прилагане на T на Student за независими проби (p Фиг. 2 Среден прием DC: Конвенционална диета; HFD: Диета с високо съдържание на мазнини. * За разлика от DC групата (стр