Дневна пулсираща секреция на фоликулостимулиращ хормон (FSH) при овце в предпубертетно време със и без
Пулсираща секреция на фоликулостимулиращ хормон (FSH) при предпубертетни женски овце със и без ограничение на храната
S. E. RECABARREN, Biol., M.Sc .; A. LOBOS, M.V., Mg.S .; O. POBLETE, M.V .; P. MUÑOZ, J. PARILO, Ing. Agr. Лаборатория по физиология на животните и ендокринология, Факултет по ветеринарна медицина,
Университет на Консепсион, Campus Chillán
* Финансиран от проекта FONDECYT 1990389.
РЕЗЮМЕ
Ключови думи: FSH, овце, пубертет, ограничаване на храната.
Ключови думи: FSH, агнета, пубертет, ограничаване на храните.
ВЪВЕДЕНИЕ
Целта на настоящата работа е да разпознае характеристиките на дневната пулсираща секреция на FSH при препубертатни овце с ограничено хранене в продължение на 6 до 10 седмици и да ги сравнява със секрецията на FSH, проявена от овцете без ограничение на храната на същите възрасти.
МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ
Проучване на пулсативността на FSH. Проучването за пулсиране на FSH се състои от събиране на кръвни проби (3 ml) през предварително имплантирания югуларен катетър на интервали от 10 минути за период от 5 часа (10: 00-15: 00 часа) на 20, 26 и 30 седмици на възраст, след 0. 6 и 10 седмици ограничаване на храната на експерименталната група. Кръвните проби се отлагат в хепаринизирани епруветки (10 IU хепарин/ml кръв), те се центрофугират при 1000 xg, в продължение на 15 минути, плазмата се отделя и замразява при 20 ° C, до последващия анализ на плазмените концентрации на FSH от радиоимуноанализ (RIA).
FSH радиоимуноанализ. Радиоимунологичният анализ на FSH беше извършен с материали на NIADDK (САЩ), следвайки протокола, посочен с материалите. Накратко, 200 µl стандартен овчи FSH (oFSHRP) в диапазон от 0,02 до 25,6 ng/епруветка или 200 µl неизвестна проба бяха инкубирани със 100 µL йодиран FSH (oFSH I-1 AFP 5679 C) и 100 µL антисерум. срещу овчи FSH (AFP C 5228113) за 24 часа при стайна температура. След това се добавят 100 uL второ антитяло и инкубацията продължава 48 часа. Впоследствие епруветките се центрофугират при 1000 х g в продължение на 40 минути при 4 ° С, супернатантата се изхвърля и пелетите се определят количествено в LKB гама спектрометър. Минималната откриваема концентрация, съответстваща на 90% от контролния буфер, е 0,2 ng/ml, с вариращ коефициент на вътрешно-тестови изследвания от 6% и между-анализ на 10%.
Определяне на характеристиките на пулсиращата секреция на FSH. Концентрациите на FSH в плазмата на всяка овца се анализират индивидуално с помощта на компютърната програма CLUSTER, разработена от Veldhuis и Johnson (1986). Тази програма позволява да се идентифицират, чрез повтарящ се алгоритъм, хормоналните колебания, определени като импулси в последователна поредица от проби, като се използва коефициентът на вариация на RIA, честотата на вземане на проби, определената форма на импулса, зададена от оператора ( използване на 1 или повече точки за пика ? и една или повече точки за надира) и статистическите разлики между точките. Програмата също така идентифицира средната амплитуда на импулсите, интервала между импулсите, продължителността на импулсите и надира (средната стойност на плазмените концентрации между импулсите). За идентифициране на FSH импулсите е избрана 3x3 форма на импулса, за да се дефинират съответно максимумът и минимумът с t тест 2,75 (Veldhuis и Johnson, 1986). При тази процедура вероятността за идентифициране на фалшиво положителен импулс беше по-малка от 5%.
Статистически анализ. Параметрите на пулсиращата секреция на FSH: средно напречно сечение на периода (ng/mL/5h), честота на импулсите (брой импулси/5h), амплитуда на импулсите (ng/mL) и надир (ng/mL) присъстващи на 20, 26 и 30 седмици са анализирани в същата група посредством дисперсионен анализ за повтарящи се проби в блок-дизайн, като се сравняват средните стойности с теста на Нюман Кийлс, използвайки статистическата програма GB.Stat v.6. Данните са показани като средна стойност ± стандартна грешка. Взе се предвид Р 0,05). От друга страна, при овцете майки, подложени на ограничаване на храненето, се наблюдава тенденция към намаляване между 20 и 30 седмична възраст след ограничаване от 10 седмици. Средната плазмена концентрация на FSH (ng/mL/5h) в групата на експерименталните овце-майки е била по-ниска с повече от 50% в сравнение с плазмените концентрации на FSH на контролните овце (P> 0,05).
Както е показано в таблица 1, честотата на импулсите на FSH не показва статистически разлики между възрастите в същата група или между групите. Амплитудата на FSH импулсите има тенденция да се увеличава между 20 и 30 седмична възраст в контролната група, с намаляване с повече от 50% при овцете с ограничено хранене между 20 и 30 седмична възраст (P> 0,05). Амплитудата на импулсите обикновено е по-ниска при овцете с ограничение на храната, отколкото при контролната група на 30-седмична възраст (P = 0,079), след 10-седмично ограничаване на храната.