Видове тестове за откриване на COVID-19 Labclinics
COVID-19
Видове тестове за откриване на COVID-19
До момента са налични много диагностични тестове за заболяване COVID-19. В тази публикация в блога ще се съсредоточим върху показването на характеристиките и основните предимства, които да се използват при откриването, скрининга и мониторинга на заболяването.
- 1. Въведение
- 2) Обратна транскрипция и полимеразна верижна реакция (RT-PCR)
- 3) Страничен поток/колоидна имунохроматография
- 4) Имуноанализи от тип ELISA
- 5. Заключения
1. Въведение
Разработва се набор от молекулярни техники, вариращи от лабораторни тестове до диагностика и лечение на пациенти с COVID-19. Тези техники, макар и добре известни на изследователите и клиницистите, както и анализи на антитела и антигени, може да са относително непознати за общата общност. Тази публикация в блога е написана, за да опише и обясни основните принципи на основните диагностични тестове за COVID-19, които се използват в момента.
две) Обратна транскрипция и полимеразна верижна реакция (RT-PCR)
PCR е много разпространена техника, която се използва (и се използва) в изследванията и диагностиката през последните 30 години за откриване на генетична информация. RT-PCR е версия на тази техника за откриване на присъствието на РНК. В момента тази техника се използва като тест за откриване на наличието на вируса SARS-CoV-2. Този тип тест често се използва като тест от първа линия за COVID-19, тъй като директно тества за наличието на РНК на вируса.
RT-PCR тестовете са доста бърз, отзивчив и надежден, способни да дадат резултати за 3-4 часа, въпреки че това обикновено отнема повече време, ако първо трябва да се изпратят проби до специализирани външни лаборатории (средно 6-8 часа). Много диагностични и изследователски компании произвеждат RT-PCR продукти, тестове и машини, за да направят технологията широко достъпна. Някои RT-PCR тестове са разработени като комплект „всичко в едно“, намалявайки лабораторната работа и възможността за замърсяване.
Как работи?
След като пробата бъде събрана, протеини и други молекули трябва да бъдат отстранени, като се изолират само РНК. Това ще бъде смес от генетичен материал на човек, както и всяка вирусна РНК, която може да присъства.
Ензимите на комплекта транскрибират РНК в ДНК, която се усилва, за да позволи откриването на вируса чрез използване на термичен циклер, който генерира температурна програма, за да произведе приблизително 35 милиарда копия на вирусна ДНК за всяка верига вирусна РНК, която първоначално е била налична.
Са използвани флуоресцентни маркери те са способни да се свържат с амплифицирана ДНК и да произвеждат светлина, която машината може да прочете, за да даде резултата от теста. Ако интензивността на произведената светлина достигне определен праг, тя се класифицира с резултат положителен. Броят на температурните цикли на PCR, които са били необходими преди достигане на прага на флуоресценция, се записва и осигурява оценка на количеството вирус, присъстващо в пробата на пациента.
Първо, вирусната ДНК се загрява до 94 ° С, разделяйки двете вериги на ДНК. След това реакцията се охлажда до 55 ° C. Този факт позволява на малки порции комплементарна ДНК (праймери или праймери) да се свържат с вирусната ДНК. И накрая, температурата се повишава до 72 ° C, така че Taq полимеразата да може да удължи всяка от тези ДНК вериги. И по този начин започва нов цикъл на PCR.
Какво открива RT-PCR тестът?
RT-PCR открива дали вирусна РНК присъства в пробите на пациента или не. Това се прави чрез усилване на региони от генетичния материал на вируса, обикновено протеина Спайк, на протеин N вълна плик от вируса. Резултатът от RT-PCR показва броя на циклите, необходими за откриване на праг за откриване на ДНК, по такъв начин, че колкото повече вирус присъства в пробата, толкова по-малък е броят на циклите, необходими за получаване на сигнала. Тези проби обикновено се вземат от носа или гърлото с помощта на дълги или къси тампони.
Какво означава полученият резултат?
RT-PCR тестът е силно чувствителен и резултатът му предоставя информация дали вирусът присъства в пациента.
Положителен резултат от теста: - Положителен резултат от PCR означава, че лицето, от което е взета пробата, е в момента заразен от вируса.
Отрицателен резултат от теста: - Отрицателният резултат от PCR може да означава, че: лицето в момента не е заразен от този вирус или че вирусът не присъства в място, където е взета пробата, също фалшиво отрицателен резултат може да бъде резултат от a проба с ниско качество или какво е това твърде рано или твърде късно при инфекция за откриване на репликация на вируса. Това е причината, поради която отрицателните резултати от теста изискват да се вземат нови проби от пациенти няколко дни по-късно, за да се намали вероятността от неправилно пропускане на заразено лице.
Тестът RT-PCR nили може да открие дали човек е имал вируса и надмина болестта COVID-19, тъй като открива само кога има активен вирус.
Предимства и ограничения
- - RT-PCR е здрава техника.
- - Тъй като RT-PCR е толкова разпространен в лабораториите, технологията вече е налице за откриване на наличието на вируса.
- - RT-PCR може да открие продължаващи инфекции, позволявайки на медицинския персонал да определи кой е заразен и кой не.
- - RT-PCR се основава на откриването на вируса, така че за целите на преброяването е възможно да се игнорират онези пациенти, които са отделили вируса и са се възстановили от болестта.
- - Разпределението на вируса през дихателните пътища варира между пациентите, така че дори ако човек е заразен, понякога вирусът се открива само в храчки или тампон на носоглътката, но не е задължително едновременно и на двете места.
- - RT-PCR за COVID-19 може само да определи дали човек в момента е заразен с този конкретен коронавирус. Не може да предостави информация за други заболявания или симптоми.