Стимулираната от жлъчката липаза и свързаният с панкреаса липаза протеин 2 са

- Обобщение
- Главен
- МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ
- Процедури с животни.
- Количествено определяне на нивата на експресия на иРНК.
- Статистика.
- РЕЗУЛТАТИ
- ДИСКУСИЯ
- Терминологичен речник
Обобщение
По време на детството основните условия за храносмилането на хранителните мазнини се различават от тези в живота на възрастните. Стимулираната с жлъчна сол липаза (BSSL) е ензим, експресиран в екзокринната панкреаса, а при някои видове (включително хората) и в кърмещата млечна жлеза и секретиран с мляко. Целта на това проучване е да се сравни онтогенезата на четири панкреатични липази [BSSL, триглицериди панкреатична липаза (PL), панкреатичен липазен протеин 2 (PLRP2) и фосфолипаза A2 (PLA2)] във вид, който доставя мляко на BSSL ( мишка) и такъв, който не го прави (плъхът). Проследихме експресията на четирите панкреатични липази от постнаталното d 1 до отбиването и при двата вида. Установихме, че BSSL и PLRP2, две липази с широка субстратна специфичност, доминират. Едва след отбиването се предизвиква значителна експресия на PL и PLA2. Следователно BSSL и PLRP2 изглежда са отговорни за усвояването на мазнините, стига млякото да е основната храна. Освен това ранният времеви модел на експресия на BSSL се различава при различните видове. Предполагаме, че BSSL от млечен произход е в състояние да компенсира по-бавното онтогенезиране на експресията на BSSL на панкреаса при мишки.
Главен
Екзокринният панкреас синтезира и секретира няколко липолитични ензима, които работят съвместно със стомашната липаза, за да постигнат пълноценно храносмилане и усвояване на хранителните мазнини (1). При възрастни панкреатичната триглицеридна липаза (PL) е основният ензим, отговорен за чревното смилане на триглицеридите в храната. В действителност, в присъствието на колипаза и жлъчни соли, е изчислено, че PL представлява 56% от интралуминалната хидролиза на триглицеридите в диетата при възрастни (2). PL е активен предимно в три и диглицериди, докато фосфолипазата А2 (PLA2) е основният ензим, участващ в хидролизата на фосфолипидите в храната при възрастни (3).
Стимулираната с жлъчка липаза (BSSL) е друг важен ензим, участващ в храносмилането и усвояването на мазнините в храната. Подобно на PLRP2, BSSL има способността да хидролизира различни субстрати, например три, ди и моноглицериди; холестерилови естери; мастноразтворими витаминни естери; фосфолипиди; галактолипиди; и керамиди (15-17). BSSL се експресира в екзокринния панкреас при всички видове, а при някои видове (включително хора и мишки, но не и при плъхове), той се експресира и в кърмещи млечни жлези и се секретира с мляко (18-20). Полученият от мляко BSSL допринася значително за ефективното използване на млечната мазнина при новородени (1). Изчерпването на BSSL при генетично модифицирани мишки причинява малабсорбция на мазнини и последващо изменение на епитела, получено от мазнини в дисталния илеум (21). Интересното е, че когато осиновителките, експресиращи активна BSSL в кърмата си, кърмят малките с дефицит на BSSL, абсорбцията на мазнини се възстановява до нормално състояние и не се откриват чревни лезии.
Следователно доставяното мляко - BSSL допринася за ефективното усвояване на млечната мазнина при видове, които експресират BSSL в млечните жлези по време на лактация. Очевидно това не може да се случи при видове, които не отделят BSSL с мляко. Предполагаме, че експресията на панкреатичните липази по време на лактационния период се различава между видовете, които имат BSSL, снабдени с мляко, и видовете, които не го правят. Следователно, ние сравнихме онтогенезата на липазите, секретирани от екзокринния панкреас при мишката, която има BSSL в млякото, и плъховете, които не. Съобщаваме за значителен различен времеви израз, подкрепящ виждането, че BSSL, заедно с PLRP2, са доминиращите липази, участващи в храносмилането, докато млякото е основната храна.
МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ
Процедури с животни.
Мишки Balb/c/Bkl и плъхове Sprague-Dawley са закупени от Scanbur AB (Sollentuna, Швеция) и са отгледани вътрешно. Животните се държат в помещения с 12:12 h цикъл на светлина и тъмнина и с неограничен достъп до стандартната диета R34 (Lactamin, Стокхолм, Швеция) и вода. Всички процедури с животни бяха одобрени от Регионалния комитет по етика в експерименталните науки за животните, Умео, Швеция.
В различни моменти от време, т.е. в постнатална d 1, 2, 3, 4, 5, 7, 10, 12, 16, 20, 24, 28, 32 и на 6-месечна възраст (за РНК) и в постнатална d 1 7, 14, 21 и 28 (за протеини), поне три мишки и три плъхове бяха умъртвени чрез цервикална дислокация и панкреасът беше внимателно отстранен, за да се изолират РНК и протеини. Преди клането животните се наблюдават, когато се хранят (мляко или храна) и след това незабавно се преместват в клетка без храна (само вода) за период на гладно от 2 часа.