PCR-Multiple за диагностика на Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum

mycoplasma

В
В 		В

Персонализирани услуги

Списание

  • SciELO Analytics
  • Google Scholar H5M5 ()

Член

  • Испански (pdf)
  • Статия в XML
  • Препратки към статии
  • Как да цитирам тази статия
  • SciELO Analytics
  • Автоматичен превод
  • Изпратете статия по имейл

Индикатори

  • Цитирано от SciELO

Свързани връзки

  • Подобно в SciELO

Дял

Перуански вестник за експериментална медицина и обществено здраве

печатна версия В ISSN 1726-4634

Преподобни Перу. мед. опит. обществено здраве В т. 24 В п. Лима Април/юни В 2007

ОРИГИНАЛНИ ПРЕДМЕТИ

PCR-Multiple за диагностика на Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum

MГєltiplex-PCR за диагностика на Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum

Ключови думи: Микоплазмени инфекции; Инфекции на уреаплазма, верижна реакция на полимераза, негонококов уретрит (източник: DeCS BIREME).

Ключови думи: Микоплазмени инфекции; Инфекции на уреаплазма; полимеразна верижна реакция; Негонококален уретрит (източник: DeCS BIREME).

ВЪВЕДЕНИЕ

Видовете микоплазма и уреаплазма са свързани с различни заболявания на дихателните и урогениталните пътища, както при жените, мъжете, така и при децата. Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum са най-често идентифицираните видове1.

Тези микроорганизми, принадлежащи към клас Mollicutes, се считат за изключително трудни за тяхното размножаване in vitro, както поради хранителните изисквания за тяхното размножаване, така и поради подчертаната им чувствителност към промени в рН, температура, осмотично налягане, ултравиолетови лъчи, повърхностноактивни вещества, антитела и допълнение, факт, който прави изолацията чрез бактериологична култура трудна2,3.

МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

РЕФЕРЕНТНА ДНК ПРОБА

НАЧАЛНИ КОМПЛЕКТИ ЗА МЕТОДА PCR-MÁLTIPLE

Използвани са праймерите MgPaF-MgPaR, комплементарни на регион на адхезивния ген на гена M. genitalium (MgPa), описан от Jensen et al.6, набор от праймери, допълващ фрагмент от 280 bp от РНК гена 16S рибозомна РНК от M. hominis и два комплекта праймери, единият от които допълва фрагмент от спейсърния регион между 16S и 23S рибозомните РНК гени на U. parvum, а другият набор допълва фрагмент от спейсърния регион, съседен на уреазата ген и специфичен за U. urealyticum, описан от FernÃndez et al.7 (Таблица 1).

РЕАКЦИОННА СМЕС

Усилване на ДНК

Амплификацията на ДНК се извършва в термичен циклер "Personal MastercyclerR" (Eppendorf, Германия), като се коригират условията за амплификация на ДНК на референтните щамове, програмирани при 95 ° С за четири минути, последвани от цикли от 94 ° С за 30 секунди, тестване с три различни температури на хибридизация: 55, 57 и 60 ° С за 30 секунди и 72 ° С за една минута, с окончателно удължаване при 72 ° С за пет минути, оценяване с 35 и 40 цикъла.

АНАЛИЗ НА УСЛОВНИТЕ ПРОДУКТИ

ИЗПИТВАНЕ С КЛИНИЧНИ ПРОБИ

Анализирани са 34 проби от уретрален ексудат, отрицателни при тестовете за откриване на Neisseria gonorrheae, от същия брой пациенти от мъжки пол, посещавали Микробиологичната лаборатория на Военна болница "Карлос Хуан Финлей", в периода от октомври до декември от 2005г.