Изолиране и характеризиране на Escherichia coli O157 H7 от говеждо месо в

изолиране

В
В 		В

Персонализирани услуги

Списание

  • SciELO Analytics
  • Google Scholar H5M5 ()

Член

  • Испански (pdf)
  • Статия в XML
  • Препратки към статии
  • Как да цитирам тази статия
  • SciELO Analytics
  • Автоматичен превод
  • Изпратете статия по имейл

Индикатори

  • Цитирано от SciELO

Свързани връзки

  • Подобно в SciELO
  • uBio

Дял

Перуански вестник по биология

версия В он-лайн В ISSN 1727-9933

Rev. peru biol.V vol.20V no.2В LimaВ август В 2013

ОРИГИНАЛНИ РАБОТИ

Изолиране и характеризиране на Ешерихия коли O157: H7 от говеждо месо в Лима-Перу

Изолиране и характеризиране на Ешерихия коли O157: H7 от месодайни говеда в Лима-Перу

2 Лаборатория по химия на храните, Факултет по биологични науки, Universidad Nacional Mayor от Сан Маркос.

Обобщение

Ключови думи: Ешерихия коли O157: H7, говеда, говеждо месо, фактори на вирулентност.

Резюме

Целта на изследването е да се изолира и характеризира Е. coli O157: H7 от прясно смляно говеждо месо, получено на различни пазари на храни. Анализирани са 195 проби, за изолиране и изброяване на Е. coli е използвана техника с най-вероятна бройка, използваща множество епруветки, за изолиране и характеризиране на Е. coli O157: Н7 селективно обогатяване и биохимичен анализ, характерни колонии са потвърдени серологично. За да се определи наличието на шигатоксин (stx1, stx2) и интимин (eaeA) беше направено с мултиплекс PCR в реално време и за ентерохемолизин тестът за хемолиза. 87,18% от пробите са положителни за Е. coli, а 77,95% имат брой, по-голям или равен на 50 NMP/g. Бяха получени 3 (1,54%) щама на E. coli O157: H7, един stx1 +/stx2 +/eaeA - и ентерохемолизин -, един stx1 +/stx2 -/eaeA + и ентерохемолизин - и другият stx1 -/stx2 -/eaeA - и ентерохемолизин +. Също така са получени 4 (2,05%) щама на Е. coli O157 non H7, без представени фактори на вирулентност. Проучването установи, че потенциалът за риск E. coli O157: H7 засяга населението на Лима.

Ключови думи: Ешерихия коли O157: H7, говеда, говеждо месо, фактори на вирулентност.

Въведение

Ентерохеморагичната EC подгрупа (EHEC) е най-агресивният серотип за хората и според СЗО, щам STEC, който се счита за EHEC, трябва да произвежда интимин и ентерохемолизин; Има повече от 150 серотипа, като най-често срещаният в световен мащаб е Е. coli 0157: H7.

В Перу първата находка на Е. coli O157: H7 е направена във изпражненията на бебе, дошло от Tacna, щамът представя 3-те фактора на вирулентност (Huapaya et al. 2001, Huguet et al. 2002). Мора и др. (2007) в проучване на 102 проби говеждо месо в столицата Лима, те откриха 22,55% (23) положителни за Е. coli O157; От общия брой положителни резултати са анализирани 10 (43,48%) щама, като се проверява дали всички са E. coli O157: H7, произвеждащи 03 вирулентни фактори.

Целта на това проучване е да се определи наличието на щамове на Е. coli O157: H7 в проби от прясно смляно говеждо месо от говеда, които се продават в различни области на Метрополитен Лима и да се определи наличието на фактори на вирулентност.

Между юни 2009 г. и януари 2011 г. бяха анализирани 195 проби прясно говеждо месо от едър рогат добитък, събрани в произволно избрани 65 щанда, разположени в 33 хранителни пазара, разположени в 17 района на столичния град Лима. Три проби бяха събрани на всяка станция, по една на всеки шест месеца. Месото се доставяше от три хладилника и две камери и беше готово за продажба на обществеността.

Щамът Е. coli ATCC 918026 се използва като положителна контрола, а Е. coli АТСС 25922 като отрицателна контрола.

Резултати

От 195 проби прясно смляно говеждо месо, 87,18% (170) са положителни за Escherichia coli, а 77,95% (152) имат брой, равен или по-голям от 50 MPN/g.

От общите проби 1,54% (03) представиха E. coli O157: H7; Те бяха наречени щамове CE 001, CE 002 и CE 003; трите изолата са получени от проби, събрани на пазари в областите Комас, Ла Виктория и Сан Хуан де Мирафлорес, съответно. Трите щама са имали колонии отрицателен сорбитол, отрицателна глюкориназа, положителна подвижност, положителен индол, отрицателен сероводород, отрицателен цитрат, положителна лизин декарбоксилаза и ферментация на глюкоза и лактоза. 2,05% (04) представиха E. coli O157, а не H7.

От Е. coli O157: Н7 щам CE 001 беше stx1 +/stx2 +/eaeA -/ентерохемолизин -; щам EC 002 беше stx1 +/stx2 -/eaeA +/ентерохемолизин -, а щам CE 003 беше stx1 -/stx2 -/eaeA -/ентерохемолизин +. От E. coli O157 не-H7 щамове, всички са отрицателни за фактори на вирулентност.

При мултиплексната PCR в реално време присъствието на stx1 и eaeA беше доказано в щам CE 002, чрез образуване на флуоресцентни пикове, генерирани от stx1 и eaeA гените; първият връх принадлежи на eaeA, а вторият на stx1 (фиг. 1). В случая на щама CE 001 бяха доказани пикът, генериран от гена stx1 и втори пик на флуоресценция, генериран от гена stx2 (Фиг. 2). В щам CE 003 се наблюдава ореол на хемолиза около културата (Фиг. 3).

Дискусия

В Лима, Мора и сътр. (2007) установяват високо разпространение (22,55%) в 102 проби от говеждо месо, всички анализирани щамове (10) са произвели 03 фактора на вирулентност; Rivera et al. (2012) откриват серотипа на E. coli O157 в 1,75% (02) от 114 проби говежди изпражнения, единият от щамовете произвежда stx1 и eaeA, а другият само stx1. Вземането на проби от Mora et al. се проведе между октомври 2000 г. и февруари 2001 г., това на Rivera et al. между ноември и декември 2010 г. и това на нашето проучване между юни 2009 г. и януари 2011 г. През последните 15 години не е имало огнища на болестта в Лима, така че може да се приеме, че това е временно разпространен серотип.

Благодаря

Цитирана литература

Barletta F., T. Ochoa, L. Ecker L, et al. 2009. Валидиране на анализ на пет колонии с помощта на мултиплексна PCR в реално време за откриване на диареогенна Escherichia coli. J Clin Microbiol. 47 (6): 1915-1917. DOI: 10.1128/JCM.00608-09 [Връзки]