Свързващият протеин rna hur медиира цитопротекцията чрез стимулиране на

свързващият

  • Субекти
  • Обобщение
  • Въведение
  • Резултати
  • HuR взаимодейства с XIAP IRES
  • HuR се свързва директно с IRES XIAP РНК
  • Клетъчните нива на HuR модулират активността на XIAP IRES
  • Клетъчните нива на HuR модулират транслацията на ендогенна XIAP иРНК
  • HuR-медиираната индукция на XIAP предпазва клетките от индуцирана от етопозид клетъчна смърт
  • Дискусия
  • Допълнителна информация
  • Файлове с изображения
  • Допълнителна фигура 1
  • Word документи
  • Допълнителна легенда за фигурата

Субекти

  • Клетъчна смърт
  • РНК-свързващи протеини
  • Превод

Обобщение

Експресията на вътрешния инхибитор на клетъчната каспаза XIAP се регулира главно на нивото на протеинов синтез. 5 'нетранслираният регион съдържа вътрешен мотив на място за влизане на рибозома (IRES), който поддържа независим от капаците транслация на XIAP иРНК по време на клетъчен стрес. В това проучване ние показваме, че РНК-свързващият протеин HuR, за който е известно, че организира антиапоптотична клетъчна програма, стимулира транслацията на XIAP иРНК чрез IRES XIAP. Освен това, ние показваме, че HuR се свързва с XIAP IRES in vitro и in vivo и стимулира набирането на XIAP иРНК в полизоми. Важно е, че защитата на индуциращия апоптозата агент етопозид чрез свръхекспресия на HuR изисква наличието на XIAP, което предполага, че медиираната от HuR цитопротекция се изпълнява частично чрез подобрена транслация на XIAP. Нашите данни показват, че XIAP принадлежи към HuR-регулирания РНК оперон на антиапоптотични гени, който заедно с Bcl-2, Mcl-1 и ProTα допринася за регулирането на клетъчното оцеляване.

Въведение

Х-свързаният инхибитор на апоптоза (XIAP) е прототипният член на инхибитора от семейството на апоптоза протеин. XIAP изпълнява няколко различни функции в клетката, включително модулация на медиирана от рецептора трансдукция на сигнала, убиквитинация на протеини и главно директно инхибиране на каспаза и по този начин регулиране на клетъчното оцеляване (прегледано в Liston et al., 2003; Dubrez-Daloz et al., 2008) Въпреки че не са описани мутации, които свързват XIAP с онкогенната трансформация, повишени нива на XIAP са докладвани при различни видове рак и са свързани с повишена резистентност към химиотерапия и радиация (Tamm et al., 2000, 2004a, 2004b; Holcik et al., 2000b; Yoon et al., 2006; Gu et al., 2009). Терапевтичният потенциал за насочване на експресията на XIAP наскоро беше демонстриран в няколко клинични проучвания (Schimmer et al., 2005, 2009; Dean et al., 2007, 2009).

Клетъчните нива на XIAP се регулират от няколко различни механизма, но преобладаващата регулация изглежда е на нивото на иницииране на транслацията (Holcik, 2003). 5 'нетранслираният регион (5' UTR) на иРНК на XIAP съдържа мотив на вътрешно място за влизане на рибозома (IRES), който задвижва ефективно транслация на иРНК на XIAP по време на клетъчен стрес, когато глобалната транслация зависи от капачката е нарушена (Holcik et al., 1999; Yoon et al., 2006; Gu et al., 2009). Задвижваният от IRES транслация на клетъчни иРНК наскоро се очерта като важен регулатор на селективния транслация, особено при условия на хипоксия, ендоплазмен стрес или серумен глад (Holcik et al., 2000a; Holcik and Sonenberg, 2005). Тези състояния често присъстват в тумори и много ракови клетки се нуждаят от медииран от IRES транслация на специфични иРНК за тяхното оцеляване (Braunstein et al., 2007; Silvera et al., 2009). Въпреки че е идентифицирана промяната от зависим транслация към IRES (Braunstein et al., 2007), точните механизми и кохорта клетъчни протеини, които допринасят за регулирането на IRES-зависимия транслация, са неясни.

XIAP IRES е с дължина 162 нуклеотида и образува отчетлива РНК структура (Baird et al., 2007). Преди това сме характеризирали последователността и структурните атрибути на XIAP IRES (Holcik et al., 1999; Baird et al., 2007) и сме започнали да изясняваме механизма, който регулира неговата активност. Ние и други идентифицирахме IRES фактори на действие (ITAF), клетъчни протеини, които специфично се свързват и регулират IRES XIAP. Интересното е, че въпреки че някои от тези фактори стимулират функцията XIAP IRES (Автоантигенът (Holcik и Korneluk, 2000); hnRNP C1/C2 (Holcik et al., 2003); mdm2 (Gu et al., 2009)), другите го правят така че потискане (hnRNP A1 (Lewis et al., 2007); PTB (Baird et al., 2007)). Въпреки това, естеството на IRES XIAP рибонуклеопротеиновия комплекс (RNP) и идентичността на всички ITAF XIAP остават неизвестни.