Индуцируем от макрофаги С-тип лектин лежи в основата на фиброзата на мастната тъкан, индуцирана от

Субекти
Обобщение
Въведение
Резултати
Израз на мастна тъкан при затлъстяване.
Променено разпределение на липидите при мишки Минкъл KO
Подобрява метаболизма на глюкозата при мишки Минкъл KO
Намаляване на фиброзата на мастната тъкан при мишки Минкъл KO
Намаляване на образуването на CLS в мастната тъкан на мишки Минкъл KO
Фиброгенна генна експресия, стимулирана от mincle в макрофаги
Увеличение на миофибробластите, стимулирани от mincle в SVF
Стимулирана от Mincles интерстициална фиброза в мастната тъкан
Дискусия
Методи
Реактиви
Животни
Хистологичен анализ
Хибридизация в ако ти
Поточен цитометричен анализ.
Конфокален микроскопски анализ
Съдържание на колаген в мастната тъкан
Съдържание на триглицериди в черния дроб
Тестове за толерантност към глюкоза и инсулин
Уестърн блотинг на Akt
Анализ на серума
TDM стимулация
Количествена PCR в реално време
Анализ на микрочипове
BMT експерименти
статистически анализ
Допълнителна информация
Присъединяване
Омнибусна генна експресия
Допълнителна информация
PDF файлове
Допълнителна информация
Коментари

Субекти

Моноцити и макрофаги
Затлъстяване
Патогенеза

Обобщение

Въведение

Като място на кръстосано препращане между адипоцитите и макрофагите, има уникална структура в затлъстелата мастна тъкан, наречена короновидна структура (CLS), където макрофагите се считат за отстраняване на остатъчни липидни капчици от мъртвите адипоцити 9, 10. Хистологично провъзпалителните M1 макрофаги се агрегират, за да съставят CLS в мастна тъкан на хора и гризачи. От друга страна, М2 макрофагите са разпръснати в интерстициалните пространства между адипоцитите 10. По-специално, броят на CLS корелира положително със системната инсулинова резистентност при затлъстели индивиди, 11, 12, което предполага патофизиологичната роля на CLS при възпаление на мастната тъкан и системния метаболизъм на енергия. Въпреки това, начинът, по който CLS се образува в мастната тъкан по време на затлъстяването и как участва в ремоделирането на мастната тъкан, е слабо разбран.

Индуцируемият от макрофаги лектин тип С (Mincle, Clec4e или Clecsf9) е патогенен сензор, който разпознава патогенни гъби и Mycobacterium tuberculosis 13, 14, 15, 16 и както подсказва името му, той се индуцира в макрофагите от липополизахарид a през Toll- като рецептор 4 (TLR4; справка 17). По-рано съобщавахме, че наситените мастни киселини също индуцират експресия на Mincle в макрофаги чрез TLR4 (реф. 18). Освен това, индуцираното от затлъстяването увеличение на експресията на Mincle в мастната тъкан е значително отслабено при мишки C3H/HeJ с дефектна TLR4 сигнализация спрямо контролните мишки C3H/HeN 18. Yamasaki et al. съобщава, че Mincle може също така да открие клетъчна смърт, за да индуцира провъзпалително производство на цитокини и предложи ролята на Mincle при стерилно възпаление 19. Наскоро показахме, че Mincle се индуцира в макрофагите на мастната тъкан по време на взаимодействието между адипоцитите и макрофагите, поне отчасти, чрез наситената мастна киселина/TLR4/NF-кВ път. Понастоящем не е ясно дали Mincle регулира възпалението на мастната тъкан и по този начин системния метаболизъм на енергията при затлъстяване и, ако е така, как се прави това остава да бъде изяснено.

Тук показваме, че Mincle, когато се индуцира по време на развитието на затлъстяване, се локализира в макрофаги, които представляват CLS в мастната тъкан. Интересното е, че мишките Mincle KO са защитени срещу образуване на CLS от затлъстяване и фиброза на мастната тъкан, последвано от по-малко натрупване на ектопични липиди и инсулинова резистентност в черния дроб. От друга страна, лечението с трехалоза-6,6'-димилат (TDM), гликолипид на микобактериалната клетъчна стена, за която е известно, че е лиганд на Mincle 13, индуцира образуването на CLS и интерстициална фиброза в мастната тъкан при мишки. . Стимулирането на Mincle също индуцира мощна експресия на свързани с фиброза гени в макрофаги in vitro. Това проучване предоставя доказателства, че Mincle има роля в кръстосаните препратки между адипоцитите и макрофагите в CLS, което води до активиране на фиброгенната програма. Нашите данни също така показват, че антагонизмът на Mincle в макрофагите предлага нова терапевтична стратегия за предотвратяване или лечение на индуцирана от затлъстяване фиброза на мастната тъкан и следователно натрупване на ектопични липиди.

Резултати

Изразяване на мастна тъкан при затлъстяване.

( да се ) Времеви ход на експресия на mRNA на Mincle и Emr1 (F4/80) в епидидимална мастна тъкан на мишки от див тип, хранени с HFD или SD за период до 50 седмици. Стойностите са средни ± sem. Данните се анализират чрез несдвоен t-тест; п = 5 до 11; † P †† P § P §§ P -, CD45 + CD11b - F4/80 - и CD45 + CD11b + F4/80 +, изолирани от SVF. Стойностите са средни ± sem; n = 4. ( и ) Процент на клетки, експресиращи Mincle в различни имунни клетки в SVF. Стойностите са средно за четири проби.

Изображение в пълен размер

Променено разпределение на липидите при мишки Mincle KO

( да се ) Телесно тегло и мазнини и чернодробно тегло на Mincle KO и мишки от див тип на 16 седмици. Стойностите са средни ± sem. Данните се анализират с помощта на дисперсионен анализ (ANOVA), последван от теста на Tukey-Kramer. ## P # P ## P ¶ P

( да се ) Илюстрация на TDM-стимулирани експерименти, използващи SVF. SVF, приготвен от ob/ob миши епидидимална мастна тъкан, се стимулира с TDM за до 3 дни. ( б ) Ефект на TDM стимулация върху експресията на Mincle mRNA, Tnfa, свързани с фиброза гени (Tgfb1, Pdgfb, Timp1) и Acta2. Стойностите са средни ± sem. Данните се анализират чрез несдвоен t-тест; n = 4, ** P-CD31 - в SVF, богат на фибробласти, приготвен от епидидимална мастна тъкан на ob/ob мишки, използвайки системата за сортиране на магнитни клетки (MACS). Клетките се стимулираха с TDM до 7 дни. ( д ) Ефект от стимулирането на TDM върху експресията на иРНК на Acta2 и Col1a1 (колаген I). Стойностите са средни ± sem. Данните се анализират чрез несдвоен t-тест; n = 4, ** P